首页FFPE组织细胞RNA提取试剂盒使用步骤有哪些？
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FFPE组织细胞RNA提取试剂盒的使用步骤，无疑是一项精细而关键的实验操作，它直接关系到后续实验的成功与否。以下是这一过程的详细阐述，旨在帮助实验者精准掌握每一个步骤的要领。
首先，需对FFPE样品进行预处理，包括脱蜡步骤，以尽可能地去除组织上的石蜡。将样品放置于离心管内，加入适量的脱蜡液，在适宜的温度下孵育并短暂涡旋，随后去除脱蜡液。
接下来，进入组织消化阶段。向去除了脱蜡液的组织样品中加入由H2O、2X消化液和蛋白酶K组成的混合物，根据组织大小选择合适的消化流程。消化完成后，需进行高温孵育，以防止样品交联。
随后，进入RNA提取的核心步骤。向消化后的组织中加入RNA裂解液，混匀后转移至新的离心管，并加入等体积的无水乙醇。将混合物移至纯化柱中，离心以去除滤出液。接着，依次加入RNA预洗液和洗涤液，通过离心逐步去除杂质。
值得注意的是，若下游应用需要无DNA的RNA，可在柱上进行DNaseI处理，以去除痕量的DNA，避免浓度虚高。
最后，将纯化柱移至干净的离心管中，加入适量的RNase-free水，室温放置片刻后离心，即可收集到高质量的RNA溶液。此时，RNA溶液应妥善保存于-20℃，以备后续实验之需。
整个提取过程需严谨操作，确保每一步骤的准确无误，方能获得理想的实验结果。
首先，需对FFPE样品进行预处理，包括脱蜡步骤，以尽可能地去除组织上的石蜡。将样品放置于离心管内，加入适量的脱蜡液，在适宜的温度下孵育并短暂涡旋，随后去除脱蜡液。
接下来，进入组织消化阶段。向去除了脱蜡液的组织样品中加入由H2O、2X消化液和蛋白酶K组成的混合物，根据组织大小选择合适的消化流程。消化完成后，需进行高温孵育，以防止样品交联。
随后，进入RNA提取的核心步骤。向消化后的组织中加入RNA裂解液，混匀后转移至新的离心管，并加入等体积的无水乙醇。将混合物移至纯化柱中，离心以去除滤出液。接着，依次加入RNA预洗液和洗涤液，通过离心逐步去除杂质。
值得注意的是，若下游应用需要无DNA的RNA，可在柱上进行DNaseI处理，以去除痕量的DNA，避免浓度虚高。
最后，将纯化柱移至干净的离心管中，加入适量的RNase-free水，室温放置片刻后离心，即可收集到高质量的RNA溶液。此时，RNA溶液应妥善保存于-20℃，以备后续实验之需。
整个提取过程需严谨操作，确保每一步骤的准确无误，方能获得理想的实验结果。
