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2025-05-22

如何选择DNA/RNA片段分选试剂?关键指标与避坑指南

选购试剂的三大核心指标  
1.纯度与浓度:优质试剂需确保DNA/RNA无蛋白质或有机溶剂残留。例如,酚/氯仿法虽成本低,但易引入抑制剂,影响PCR效率;而磁珠法通过硅基纯化可避免此问题。  
2.操作时间:快速分选试剂盒(如离心柱型)通常30分钟内完成流程,适合高通量实验;而传统CTAB法需2小时以上,仅推荐特殊样本。  
3.样本兼容性:动物组织推荐SDS裂解试剂,植物样本需含抗氧化剂(如β-巯基乙醇)以中和多酚类物质。  

常见问题与解决方案  
-RNase污染:选择含强效抑制剂(如DEPC处理试剂)的套装,并严格分区操作。  
-片段丢失:避免过度震荡裂解,控制离心速度与时间,微量样本可增加载体RNA辅助吸附。  
-杂质干扰:共提取试剂需含蛋白酶K消化蛋白质,醋酸铵沉淀多糖。  

质量验证方法  
-分光光度法:A260/A280比值1.8-2.1表明高纯度,若低于1.8可能残留蛋白质。  
-电泳检测:DNA呈单一明亮条带,RNA需28S/18S条带清晰且比值接近2:1。