磁珠法已成为DNA/RNA片段分选的核心技术，通过磁珠表面羧基基团对核酸的可逆吸附，实现精准的片段筛选和杂质去除。其操作简便、兼容高通量自动化设备的特点，使其在NGS文库构建中广泛应用。  

磁珠分选标准流程  
1. 磁珠预处理：  
   从4℃冰箱取出磁珠，室温平衡30分钟，涡旋振荡1分钟确保均匀悬浮。  
   避免低温导致PEG沉淀，影响分选效率（PEG浓度需稳定在21%-24%）。  

2. 磁珠与样本混合：  
   根据目标片段大小调整磁珠比例：  
     ≥400bp片段：磁珠与样本体积比0.6:1；  
     100-300bp片段：按0.8:1至1.2:1梯度添加。  
   移液器轻柔吹打混匀后，室温静置5分钟，促进核酸吸附。  

3. 磁性分离与洗涤：  
   将混合液置于磁力架静置3-5分钟，待溶液澄清后弃上清（含小片段或杂质）。  
   加入200μL新鲜配制的80%乙醇清洗两次，离心管始终置于磁力架上操作，避免磁珠流失。  

4. 洗脱与质控：  
   开盖干燥磁珠3-5分钟至无乙醇残留（防止抑制下游PCR）。  
   加入20-50μL无核酸酶水洗脱，涡旋振荡10秒后静置2分钟，磁力分离后收集上清。  
   使用Qubit定量及Agilent 2100分析片段分布，确保目标片段占比>90%。  

技术优势与场景适配  
高灵敏度：可处理低至1μg的DNA样本，回收率>90%。  
灵活分选：支持100-1000bp片段范围，适配Illumina、华大智造等平台。  
自动化兼容：配合睿科、Hamilton工作站实现96孔板高通量处理，提升效率3倍。  

注意事项：  
避免磁珠长时间暴露于高温环境（>30℃），防止PEG降解。  
分选含接头二聚体的文库时，建议二次分选（磁珠比例提高至1.5:1）。