【案例分享】狼尾草RNA提取
狼尾草,多年生,须根较粗壮。秆直立,丛生,在花序下密生柔毛。叶鞘光滑,两侧压扁,秆上部者长于节间;叶舌具长约2.5毫米纤毛;叶片线形,先端长渐尖,基部生疣毛。
狼尾草,作为一种重要的能源植物,其RNA提取对于后续基因表达分析至关重要。然而,狼尾草富含多糖、多酚以及纤维素等物质,给RNA提取带来了极大挑战。
今天,我们分享一个案例——狼尾草RNA提取。
实验材料
新鲜狼尾草根
实验步骤
- 将新鲜狼尾草根组织在液氮中迅速研磨成粉末。
- 加入适量RNA提取裂解液,震荡混匀。
- 按照新百基植物组织RNA提取试剂盒(货号:N1005)说明书进行提取操作。
实验结果
提取的RNA通过凝胶电泳进行检测,电泳图谱中28S和18S条带清晰可见,且28S条带亮度约为18S条带的两倍,表明RNA完整性良好。
图1 狼尾草RNA凝胶电泳图(M: Marker;1-14: 狼尾草RNA样本)
通过Nanodrop检测RNA浓度和纯度,结果显示OD260/280比值在2.0左右,OD260/230比值大于2.0,表明RNA纯度较高,无蛋白质、多糖和多酚残留。
经验总结
狼尾草RNA提取的关键在于:
第一,液氮研磨要充分,确保细胞完全破碎;
第二,裂解液用量要充足,避免多糖多酚干扰;
第三,提取要彻底,有效去除杂质;
通过优化这些关键步骤,新百基植物组织RNA提取试剂盒(货号:N1005),能从植物组织中获取高质量的RNA,为后续的分子生物学实验奠定了良好基础。
首页
Facebook
WeChat
Twiitter