新百基生物科技的ffpe核酸提取试剂盒使用了哪些技术?
要确切了解新百基生物科技的FFPE(福尔马林固定石蜡包埋)核酸提取试剂盒具体使用的技术,最准确的信息来源是产品说明书、技术文档或直接咨询新百基。不过,一般而言,FFPE核酸提取试剂盒可能会运用到以下几类常见技术:
样本处理技术
- 脱蜡技术
- FFPE样本中含有石蜡,会影响核酸的提取,所以需要先进行脱蜡处理。常见的脱蜡方法有有机溶剂法,例如使用二甲苯等有机溶剂溶解石蜡。试剂盒可能采用优化后的脱蜡配方和流程,能更高效、温和地去除石蜡,减少对核酸的损伤。
- 组织裂解技术
- 脱蜡后的组织需要裂解以释放核酸。通常会使用含有蛋白酶K等酶类以及表面活性剂的裂解液。蛋白酶K可以消化蛋白质,破坏蛋白质与核酸之间的结合,表面活性剂则有助于溶解细胞膜和核膜,使核酸游离出来。试剂盒可能对裂解液的成分和比例进行了优化,以提高裂解效率和核酸得率。
核酸分离技术
- 硅胶膜吸附技术
- 这是一种广泛应用的核酸分离技术。硅胶膜在高盐低pH值的条件下能够特异性地吸附核酸,而蛋白质、多糖等杂质则不被吸附。当改变溶液的盐浓度和pH值时,核酸又可以从硅胶膜上洗脱下来。试剂盒中的硅胶膜可能经过特殊处理,具有更高的核酸结合容量和选择性,能够更有效地分离核酸。
- 磁珠法技术
- 磁珠表面经过修饰后可以在特定条件下结合核酸。在核酸提取过程中,磁珠与裂解液中的核酸结合,然后通过磁力架将磁珠与其他杂质分离,最后经过洗涤和洗脱步骤得到纯净的核酸。磁珠法具有操作简便、快速、易于自动化等优点,该试剂盒可能采用了具有高亲和力和特异性的磁珠,以提高核酸提取的效率和质量。
核酸纯化技术
- 洗涤技术
- 在核酸分离过程中,需要通过洗涤步骤去除吸附在核酸上的杂质。试剂盒通常会配备专门的洗涤液,其成分和配方经过优化,能够在不损失核酸的前提下,有效去除蛋白质、盐离子等杂质。
- RNase和DNase抑制技术
- 为了防止核酸在提取过程中被降解,试剂盒中可能会添加RNase和DNase抑制剂。这些抑制剂可以抑制核酸酶的活性,保护核酸的完整性。例如,使用RNase抑制剂可以防止RNA被RNase降解,确保提取到的RNA质量良好。
样本处理技术
- 脱蜡技术
- FFPE样本中含有石蜡,会影响核酸的提取,所以需要先进行脱蜡处理。常见的脱蜡方法有有机溶剂法,例如使用二甲苯等有机溶剂溶解石蜡。试剂盒可能采用优化后的脱蜡配方和流程,能更高效、温和地去除石蜡,减少对核酸的损伤。
- 组织裂解技术
- 脱蜡后的组织需要裂解以释放核酸。通常会使用含有蛋白酶K等酶类以及表面活性剂的裂解液。蛋白酶K可以消化蛋白质,破坏蛋白质与核酸之间的结合,表面活性剂则有助于溶解细胞膜和核膜,使核酸游离出来。试剂盒可能对裂解液的成分和比例进行了优化,以提高裂解效率和核酸得率。
核酸分离技术
- 硅胶膜吸附技术
- 这是一种广泛应用的核酸分离技术。硅胶膜在高盐低pH值的条件下能够特异性地吸附核酸,而蛋白质、多糖等杂质则不被吸附。当改变溶液的盐浓度和pH值时,核酸又可以从硅胶膜上洗脱下来。试剂盒中的硅胶膜可能经过特殊处理,具有更高的核酸结合容量和选择性,能够更有效地分离核酸。
- 磁珠法技术
- 磁珠表面经过修饰后可以在特定条件下结合核酸。在核酸提取过程中,磁珠与裂解液中的核酸结合,然后通过磁力架将磁珠与其他杂质分离,最后经过洗涤和洗脱步骤得到纯净的核酸。磁珠法具有操作简便、快速、易于自动化等优点,该试剂盒可能采用了具有高亲和力和特异性的磁珠,以提高核酸提取的效率和质量。
核酸纯化技术
- 洗涤技术
- 在核酸分离过程中,需要通过洗涤步骤去除吸附在核酸上的杂质。试剂盒通常会配备专门的洗涤液,其成分和配方经过优化,能够在不损失核酸的前提下,有效去除蛋白质、盐离子等杂质。
- RNase和DNase抑制技术
- 为了防止核酸在提取过程中被降解,试剂盒中可能会添加RNase和DNase抑制剂。这些抑制剂可以抑制核酸酶的活性,保护核酸的完整性。例如,使用RNase抑制剂可以防止RNA被RNase降解,确保提取到的RNA质量良好。